胰岛素抵抗作为肥胖的伴随现象，是2型糖尿病发展的核心风险因素，其本质在于胰岛素介导的葡萄糖摄取能力下降及葡萄糖输出抑制作用的减弱。胰岛素抵抗具有广泛的不良影响，但目前尚未有专门针对胰岛素抵抗症状获批的治疗药物问世，这表明我们迫切需要寻找能够有效干预此类代谢障碍的治疗手段。

四妙丸（SMW）作为祛除湿热的经典方剂，由苍术、牛膝、黄柏、薏苡仁四味药材配伍而成。此方主要针对由湿热内蕴所引发的痹症，具体表现为下肢的红肿症状，以及伴随的肌腱与骨骼疼痛。随着现代医学研究的深入，SMW的临床应用范围已得到显著拓展。依据中医理论体系，湿热的滞留与糖尿病的发病机理之间存在着密切的关联。有研究报告指出，SMW在调节机体炎症反应及提升肝细胞对胰岛素的敏感性方面展现出积极作用，为该方剂在糖尿病预防与治疗领域的应用提供了新的思路与可能。

近日，一篇发表在《Traditional Medicine Research》期刊，题为“Simiao Wan alleviates obesity-associated insulin resistance via PKC/IRS-1/PI3K/Akt signaling pathway based on network pharmacology analysis and experimental validation”的研究论文，揭示了SMW在治疗肥胖相关胰岛素抵抗（OIR）方面的作用机制。

图1 论文首页

SMW能抑制HL-7702细胞的胰岛素抵抗

为了验证SMW对PA诱导的胰岛素抵抗的影响，研究人员对IRS-1和PI3K两个蛋白在Tyr621和Tyr458位点上的胰岛素诱导磷酸化进行了检测。结果表明，当暴露于200 μMPA时，IRS-1在Tyr621位点和PI3K在Tyr458位点的胰岛素诱导磷酸化均受到显著抑制；然而，在HL-7702细胞经过24小时的SMW处理后，IRS-1和PI3K的活性均得到显著提升（图2）。由此可见，SMW通过IRS-1-PI3K-Akt信号通路改善PA诱导的胰岛素抵抗。

图2 SMW抑制PA诱导的HL-7702细胞胰岛素抵抗

SMW能抑制PA引起的HL-7702细胞糖原合成和糖异生

在探究胰岛素响应机制中，PI3K-Akt 信号通路扮演了核心角色，它通过促进糖原合成并经由GSK3β与FOXO1通路抑制糖异生，从而有效降低肝脏葡萄糖浓度。为深入剖析SMW对上述两条通路的具体影响，研究重点监测了GSK3β与FOXO1的磷酸化状态。结果显示，在HL-7702细胞模型中，预先使用PA处理显著抑制了胰岛素介导的GSK3β在Ser9位点的磷酸化水平（图3A-B）。然而，SMW的介入则呈现出明显的剂量依赖性，显著提升了Ser9位点GSK3β的磷酸化水平，进而促使糖原含量以浓度依赖的方式恢复至正常水平（图3C）。

此外，研究还关注了葡萄糖利用这一胰岛素抵抗的关键表征。数据显示，PA刺激显著降低了HL-7702细胞的葡萄糖摄取与消耗能力，而SMW处理则有效逆转了这一趋势，表现为葡萄糖摄取与消耗的显著增加（图3D-E）。综上所述，SMW能够有效逆转PA诱导的HL-7702肝细胞中糖原合成与葡萄糖利用障碍，从而对于胰岛素抵抗状态具有潜在的改善作用。

图3 SMW抑制PA引起的HL-7702细胞糖原合成和糖异生

SMW能抑制HL-7702细胞的脂质积累

相关报道称，二酰基甘油的累积与多种动物模型中展现出的肝胰岛素抵抗现象存在密切联系，此过程可能通过激活PKCε途径直接干扰肝脏内胰岛素信号的正常传导。为探究此机制，研究运用SMW对PA诱导的HL-7702细胞进行处理，旨在评估其对肝脏脂质含量的影响。结果显示，PA显著提升了肝细胞中的甘油三酯及总胆固醇水平，而SMW的介入则有效降低了这些脂质成分的累积（图4）。

研究还利用ELISA技术，对肝细胞中二酰基甘油的具体含量进行了精确测定。结果显示，SMW以浓度梯度依赖的方式，显著逆转了PA诱导下肝细胞内二酰基甘油水平的异常升高。因此，SMW在抑制PA诱导的肝细胞脂质堆积方面展现出了显著效果，为相关疾病的治疗提供了潜在的药物干预策略。

图4 SMW抑制PA诱导的HL-7702细胞的脂质积累

SMW抑制HL-7702细胞中PKCε的活性

该研究采用FRET探针技术在PKCε的C-末端和N-末端实现了对PA诱导下PKCε活性变化的即时捕捉，结果表明，在HL-7702细胞中，SMW预处理后，随着药物剂量的递减，FRET比率呈现显著下降趋势（图5A-B），表明SMW对PKCε活性的有效抑制作用。

同时，SMW在HL-7702细胞内显著减少了由PA触发的PKCε膜转位现象（图5E），这对于深入理解药物对细胞信号传导的调控具有重要意义。此外，Western Blot实验结果显示，在PA刺激下，PKCε蛋白显著从细胞质迁移至细胞膜，而SMW的干预则有效逆转了这一转位过程（图5F-G）。

据此，SMW能够显著抑制PA诱导的肝细胞内PKCε的激活过程，进而通过调节PKCε/IRS-1/PI3K/Akt信号通路，为改善OIR提供了新的治疗策略与科学依据。

图5 SWM抑制PA诱导的HL-7702细胞中PKCε的激活 

结论

综上所述，OIR发病机制复杂，涉及多信号通路交联与调控。SMW作为中药制剂，具多成分-多靶点-多途径作用模式，能够调节关键靶点和信号通路。

参考文献：

Jin J, Xu YY, Liu WP, Hu KH, Xue N, Zheng ZG. Simiao Wan alleviates obesity-associated insulin resistance via PKCε/IRS-1/PI3K/Akt signaling pathway based on network pharmacology analysis and experimental validation. Tradit Med Res. 2023;8(10):60.doi:10.53388/TMR20230512002